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722 PHS-3C 上海精密科学仪器有限公司
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紫外分光光度计对蓝莓类产品的原花青素含量测定

[导读]采用紫外分光光度法对市场上蓝莓类产品中原花青素含量进行测定,在546 nm 处测定吸光度,试验表明原花 青素在10 μg/mL~150 μg/mL 之间呈现良好的线性关系,认为以蓝莓为主要成分产品非常有必要标示原花青素含量,原花青素可以作为蓝莓类产品的质量控制指标。

  原花青素(Proanthocyanidins,简称PC)是植物王国中广泛存在的一大类多酚类化合物的总称。这类化合物由不同数目的黄烷醇聚合而成,在无机酸存在和加热处理下能产生红色的花青素。原花青素具有极强的抗氧化活性,是一种良好的氧游离基清除剂和脂质过氧化抑制剂,具有很强的抗氧化活性和自由基清除功能。原花青素在体内其抗氧化、清除自由基的能力是VE 的50 倍、VC 的20 倍,它能防治80 多种因自由基引起的疾病,包括心脏病、关节炎等,还具有改善人体微循环功能。与其它抗氧化剂不同的是,它能通过血脑屏障,直接保护大脑的神经系统。目前,原花青素已广泛应用于食品、药品、化妆品等领域。蓝莓,起源于北美,多年生灌木小浆果果树,因果实呈蓝色,故称为蓝莓。果实中含有丰富的营养成分,被联合国粮农组织列为人类五大健康食品之一。特别是花青素与原花青素,可促进视网膜细胞中视紫质的再生成,可预防重度近视眼及视网膜剥离,并可增进视力。因为它的营养价值,市场上出现了很多以蓝莓为主要成分的食品。但由于质量标准定的过于粗糙,导致产品质量良莠不齐,好坏无从分辨。笔者采用紫外可见分光光度法分析测定市售以蓝莓类产品中原花青素的含量,并对蓝莓为主要成分及蓝莓为辅料的蓝莓味产品原花青素含量进行检测对比,通过检测原花青素含量控制市售蓝莓类产品质量的可行性进行初步探索。

主要材料、仪器设备及原理

主要材料

  蓝莓凝胶糖果、蓝莓果酱、蓝莓草莓混合果汁、蓝莓果汁(含原花青素26 mg/1 000 mL)、蓝莓果汁(含原花青素3 mg/1 000 mL)、蓝莓饮品、野生蓝莓果肉饮料、蓝莓酒、蓝莓醋、蓝莓馅饼:市售;蓝莓凝胶糖果空白:根据蓝莓凝胶糖果中配方除去蓝莓成分制作。原花青素标准品(纯度99。4 %):天津尖峰天然产物研究开发有限公司;其它化学试剂均为国产分析纯试剂。

仪器设备

  752N 型紫外可见分光光度计:上海精密科学仪器有限公司;BT-125D 型电子天平:赛多利斯科学仪器有限公司;HH.S21-4 数显恒温水浴锅、XYJ-A 台式大容量离心机:金坛市科兴仪器厂。

试验原理

青海福彩网   原花青素是含有儿茶素和表儿茶素单元的聚合物。原花青素本身无色,但经过用热酸处理后,可以生成深红色的花青素离子,在546 nm 处测定原花青素在水解过程中生成的花青素离子,吸光度与原花青素含量成正比,故可测定原花青素的含量。

方法

原花青素标准溶液的制备

青海福彩网   精密称取原花青素对照品10 mg,用甲醇溶解定容至于10 mL,制成1 mg/mL 原花青素标准溶液。

试验溶液的制备

青海福彩网   精密称取硫酸铁铵2。00 g,加2 moL/L 盐酸溶液溶解并稀释至100 mL,摇匀,即为2。0 %硫酸铁铵溶液;于100 mL 容量瓶中加入约2/3 的正丁醇,精密加入盐酸5。0 mL,用正丁醇定容至刻度,即为5 %HCL/正丁醇溶液。

供试品溶液的制备

  精密称取蓝莓凝胶糖果、蓝莓凝胶糖果空白2 g,加温水熔化定容至10 mL,精密吸取1 mL,用甲醇稀释定容至10 mL。野生蓝莓果肉饮料、蓝莓草莓混合果汁,离心取上清液,用甲醇稀释;蓝莓果汁、蓝莓饮品、蓝莓醋用甲醇稀释;蓝莓果酱、蓝莓馅饼用甲醇搅拌后离心,取上清液甲醇稀释。

标准曲线的制作

青海福彩网   分别精密吸取原花青素标准溶液0。1、0。25、0。5、1。0、1。5 mL 于10 mL 容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。分别精密吸取上述溶液1 mL,加入6 mL 5 %盐酸/正丁醇溶液、0。2 mL 2。0 %硫酸铁铵溶液置具塞试管中,将试管瓶口密塞,置沸水浴中精确加热40 min,冰浴冷却15 min;用1 mL 甲醇、6 mL 5 %盐酸/正丁醇溶液和0。2 mL 2。0 %硫酸铁铵溶液做空白,于546 nm 波长处测定吸光度。供试品中原花青素含量的测定

  取供试品溶液各1 mL,以空白试剂为参比,按上述标准曲线的测定法,分别测定其吸光度值,计算样品中原花青素的含量。

结论

  通过试验可知,原花青素浓度在10 μg/mL~150μg/mL范围内,用紫外分光光度法测定蓝莓类产品中原花青素含量,适宜于蓝莓类产品中的原花青素测定。用该法检测蓝莓类产品试验结果表明,以蓝莓为主要成分的蓝莓类产品原花青素检出较高,蓝莓凝胶糖果的原花青素含量最高为3.64 mg/g;而以蓝莓为辅的蓝莓味产品原花青素检出很低,蓝莓醋的原花青素检出最低为0.03 mg/mL。因此,认为蓝莓为主要成分产品非常有必要标示原花青素含量,通过检测原花青素含量作为蓝莓类产品的质量控制指标是可行的。


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